Daftar HKI

Konstruksi DNA Untuk Ekspresi Protein Rekombinan JTAT Sebagai Bahan Vaksin Anti-Lentivirus
Tersertifikasi
21-10-2010
P00201000671
16-05-2016
IDP000041237
Paten

Invensi ini berkaitan dengan pembuatan protein rekombinan TAT untuk vaksin antivirus genus Lentivirus, khususnya virus penyakit jembrana (Jembrana Disease Virus = JDV) melalui konstruksi gen target tat dari virus penyakit jembrana ke dalam vektor plasmid pET21a, dimana klon pET21a merupakan pembawa gen tat yang dapat menghasilkan protein rekombinan TAT. Runutan basa spesifik primer yang dirancang yaitu forward primer/5’ GGAATTC/ATGCCTGGTCCCTGGGCC 3’ sebanyak 25 basa dan reverse /3’ GCGTCGAC/CGCGCAGTTAGGTGCC 5’ sebanyak 24 basa. Pasangan ensim restriksi EcoRI dan SaLI berhasil menghasilkan target potongan gen tat berukuran 289 pb (10,7 kDa). Gen tat diperoleh dari koleksi total RNA bersumber dari limfa sapi Bali terinfeksi akut penyakit jembrana dengan Reverse-Transcriptase PCR (RT-PCR) diperoleh komplimen DNA (cDNA). cDNA ini dipakai sebagai gen tat sisipan yang dikonstruksi ke dalam plasmid vektor pET21a. Berdasarkan sekuen gen target yang dihasilkan telah dibuktikan bahwa klon pET21a adalah pembawa gen tat yang menghasilkan protein rekombinan TAT dengan ukuran ±11,7 kDa. Proses uji ekspresi protein rekombinan TAT pada invensi ini dilakukan melalui sel inang Escehericia coli (E. coli) pada media LB (Luria Bertani) 100 ml. Purifikasi dan karakterisasi (dengan SDS-PAGE dan WB) telah terbukti menghasilkan protein rekombinan TAT dengan ukuran ±11,7 kDa. Protein rekombinan ini nantinya dapat digunakan sebagai bahan vaksin rekombinan penyakit jembrana (jembrana disease virus) pada sapi.

4
Terbuka
Terbit
Slamet Diah Volkandari